PCR室乔梦鸽

随着现代超声检查水平的进步，人群中甲状腺结节的检出率日益增高，我国甲状腺结节（thyroidnodule，TN）发生率为20%～76%，已成为内分泌系统的第二大疾病，约10个人中两个人有甲状腺结节，多数结节都是良性的，但其中5%-10%是恶性的，也就是甲状腺癌。大部分甲状腺结节于检查中发现，没有症状，当面对甲状腺结节时，医生通常会建议进行进一步的检查，其中细针穿刺细胞学（FNAC）和BRAFV600E基因检测是两项非常重要的诊断依据。BRAF基因是一种原癌基因，V600E代表的是BRAF基因中最容易突变的一个位点，常在黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、大肠癌、甲状腺癌、非小细胞肺癌中发生突变，目前最常应用于甲状腺癌的辅助诊断。甲状腺穿刺检查，是诊断甲状腺癌的重要方法，不过也会有大约20%-30%的患者不能完全确诊，检测BRAF-V600E突变，能够提高甲状腺穿刺检查恶性病变的敏感性，也就是如果检测到基因突变，基本就可以确诊甲状腺乳头状癌。

一、什么是细针穿刺细胞学（FNAC）检测

FNAC检查是一种通过极细的针在局部麻醉条件下穿刺甲状腺结节，抽取细胞样本进行显微镜下观察的方法。它是目前诊断甲状腺结节良恶性的“金标准”，。经超声引导下细针穿刺细胞学检查(UG-FNA)：是当今评估甲状腺结节最可靠的手段,具有创伤小,准确率高等优点;。然而，FNAC因为细胞形态的变化可能受到取样误差、炎症反应等多种因素的影响，仍有20%-30%的甲状腺结节患者无法通过FNA明确诊断，导致结果有时不确定。

随着分子生物学技术的发展，BRAFV600E基因突变检测在甲状腺癌诊断中的应用越来越广泛。约80%的甲状腺癌中存在BRAFV600E基因突变，而在良性结节中这一比例极低。因此，该基因突变可以作为区分甲状腺结节良恶性的重要标志物，堪称甲状腺癌的“指纹DNA检测”。FNAC与BRAFV600E基因检测联合应用，可以显著提高甲状腺结节的诊断准确性。

二、BRAFV600E检测意义

1.辅助诊断

在细针穿刺细胞学诊断不明确的情况下，BRAFV600E检测可作为辅助手段，提高诊断准确性。

2.指导靶向治疗

BRAFV600E突变阳性的患者可能对特定的靶向药物（如维莫非尼、达拉非尼等）敏感，检测结果可帮助医生选择最有效的治疗方案。

3.评估手术范围

在《甲状腺癌基因检测与临床应用广东专家共识(2020版)》指出PTC是否需要扩大手术范围，可结合基因突变判断肿瘤复发危险度，制定个体化手术方案。BRAFV600E突变，说明肿瘤侵袭性比较强，可能合并多个病灶，为保证手术彻底性，倾向于更大范围的手术方案。90%的甲状腺癌可以通过手术治疗，患者的5年生存率可以达到较高水平。

4.辅助预测治疗效果及预后评估

BRAF突变患者易出现碘抵抗，同时应用碘131剂量显著高于BRAF野生型患者，预示着更差的碘摄入及更高的复发概率；某些肿瘤（如甲状腺乳头状癌）中，BRAFV600E突变可能与更高的侵袭性和复发风险相关，检测结果有助于预测疾病进展。

三、检测适用范围

疑似或确诊黑色素瘤、结直肠癌、甲状腺癌等肿瘤的患者；

传统治疗效果不佳，需探索靶向治疗的患者；

需要进行分子分型以制定个体化治疗方案的肿瘤患者。

四、检测方法

采用实时荧光PCR（qPCR）技术，检测肿瘤组织或血液中的BRAFV600E突变，具有高灵敏度和特异性。

五、结果解读

六、检测流程及常见问题

1.由医生开具检测申请。

2.样本采集（肿瘤组织或血液）。

3.报告解读（由临床医生结合病情分析）。

4.检测一般无需空腹，但具体采样要求请遵医嘱。